Transcriptional control element in the 3' flanking region of the mouse Nkx-1.1 gene was identified. A downstream transcriptional regulatory element in the mouse Nkx-1.1 gene was characterized by transferring the Nkx-1.1 gene 3‘ fragment(Nkx360) into the shuttle vector pRCX at a site located immediately downstream from the chloramphenicol acetyl transferase gene(CAT) and upstream from the bovine growth hormone polyadenylation region. Analysis of the recombinant plasmid by CAT assay and by nuclease S1 mapping of transcripts indicated the possible involvement of two poly(dG-dT)ㆍpoly(dC-dA) sequences and their flanking sequences in transcription termination. Those sequences was capable of directing termination in an orientation independent manner. Gel mobility shift assay showed specific bindings of several nuclear factors to the element. The element contains two poly(dG-dT)ㆍpoly(dC-dA)(GT repeat) sequences. Sequences surrounding each GT repeat are the same and they form a unit of direct repeat including GT repeat. Some specific DNA structure formed by GT repeats and their flanking sequences, and nuclear DNA-binding proteins might be involved in the termination process.
생쥐 Nkx-1.1 유전자의 3'부위에서 전사 조절을 하는 인자를 찾아내었다. Nkx-1.1 유전자의 3'부위의 DNA 조각을(Nkx360) pRCX 벡터의 chloramphenicol acetyl transferase 유전자의 소 성장 호르몬의 poly(A) 첨가 신호사이에 끼워넣고 생쥐 Nkx-1.1 유전자의 전사 종결을 조절하는 인자를 분석하였다. 재조합 plasmid를 CAT assay와 transcript에 대한 nuclease S1 분석법을 이용하여 분석한 결과 두 개의 poly(dG-dT)ㆍpoly(dC-dA) 염기 서열과 그 주변의 염기 서열이 전사 종결에 관여할 것으로 여겨졌다. 그 염기 서열은 방향에 관계없이 전사 종결을 유발할 수 있었다. Gel mobility shift assay를 해 본 결과, 몇 개의 핵 단백질이 그 부분에 특이적으로 붙는다는 것을 알 수 있었다. 전사 종결 인자는 두 개의 poly(dG-dT)ㆍpoly(dC-dA)(GT 반복구조)를 가지고 있으며 그 주변 염기 서열과 함께 direct repeat 구조를 띠고 있다. GT 반복구조와 그 주변 염기 서열에 의하여 형성되는 특정한 DNA 구조와 DNA에 붙는 단백질이 전사 종결 과정에 관여할 것으로 여겨진다.
