The formation and maintenance of bipolar spindles is essential for chromosome segregation during mitosis. Xeroderma pigmentosum D (Xpd) is involved in proper chromosome segregation. Crumbs (Crb) functions together with Xpd and its partner Galla during nuclear division in Drosophila embryogenesis. It is unknown how these proteins regulate mitosis. Here, we show that Crb, Galla and Xpd interact with Klp61F, the Drosophila mitotic kinesin-5, to regulate mitosis. Crb and Klp61F are co-localized to spindle during nuclear division. Spindle defects caused by abnormal Crb functions were suppressed by overexpressing Klp61F. Abnormal mitosis caused by silencing of Galla-2 or Xpd were also restored by overexpressing Klp61F. Crb, Galla-2 and Xpd form a complex with Klp61F. Depletion of Galla-2 or Xpd results in reduction of Klp61F protein level in early embryos. Proteasome mutations restores the level of Klp61F and suppresses the mitotic defects from knockdown of Galla-2 and Klp61F. Taken together, our data suggest that the CGX complex plays a role for maintaining the Klp61F level to regulate the assembly of bipolar spindles.
체세포 분열 시 염색체가 분리되는데 있어 양극의 방추체(bipolar spindle) 형성 및 유지는 매우 중요한 과정이다. Xeroderma pigmentosum D (Xpd)가 염색체 분열에 관여한다는 것은 알려져 있고, Crumbs (Crb)는 Xpd와 Galla와 함께 초파리 초기 발생 시기의 핵 분열에 중요한 역할을 한다고 밝혀져 있다. 하지만 어떻게 이 단백질들이 함께 체세포 분열을 조절하는지에 대해서는 밝혀진 바가 없다. 본 연구는 초파리 motor kinesin-5인 Klp61F가 Crb, Galla, Xpd와 함께 상호작용하여 어떻게 체세포 분열에 관여하는지 보이고자 한다. Crb과 Klp61F는 핵 분열 동안 방추체에 함께 위치하며 Crb의 돌연변이에 의한 방추체 결함은 Klp61F의 과발현에 의해 억제된다. Galla-2와 Xpd의 감소에 의한 비정상적인 체세포 분열 또한 Klp61F의 과발현에 의해 회복된다. Crb, Galla-2 그리고 Xpd는 Klp61F와 복합체를 형성하고, Galla-2와 Xpd의 감소는 초파리의 이른 발생 시기의 배아에서 Klp61F 양을 감소시킨다. Proteasome 돌연변이에 의해 Klp61F의 양은 회복되며 Galla-2와 Klp61F에 의한 방추체 결함 또한 억제된다. 이러한 사실들을 종합하면, 본 연구는 CGX complex (Crb-Galla-Xpd)가 Klp61F의 양을 유지하는데 관여함으로써, 양극의 방추체를 형성하는데 있어 중요하다는 증거를 제시한다.
