Until now, interacting proteins of globular domain histone modification have been rarely identified because of its structural technical limitations. Recently, the amber codon suppression method has been developed to overcome the structural limitations and I will apply this method to my research. The site specifically modified nucleosome is reconstituted and pulled down with nuclear extracts. First I focused on the most famous and much studied H3K56Ac and H3K79Me. Before discovering the interaction candidate proteins, I found the effect of H3K56Ac and H3K79Me on transcription efficiency. Both histone modifications are characterized by the activation of transcription. Therefore, finding a protein that binds directly to these modifications will provide an in-depth understanding of transcription regulation mechanisms. In addition, various in vitro assays developed through this study will be the leading studies in the epigenetic study field.
지금까지는 기술적인 한계로 인해 히스톤 글로불러 도메인과 상호작용하는 단백질을 찾지 못하고 있었다. 최근에 한계를 극복 할 수 있는 핵심기술이 개발되어 이것을 연구에 적용시켜 연구하고자 했다. 특정 원하는 위치에 히스톤 변형이 일어나 있는 뉴클레오솜을 재조합해서 핵추출물과 함께 반응 시킨 후 면역침강과 질량 분석 실험을 통해 글로불러 도메인 화학 변형 결합 단백질을 동정하고자 한다. 본 연구에서는 히스톤 H3 라이신 56 아세틸화와 히스톤 H3 라이신 79 메틸화의 연구에 집중했고, 결합 단백질을 동정하기 전에 이 두 히스톤 변형이 전사 반응에서 전사를 활성화 시킨다는 것을 알아 내었다. 따라서 직접적으로 이 변형들과 상호작용하는 단백질을 알아내게 된다면 전사 반응 조절의 깊이 있는 연구가 가능할 것이다. 본 연구에서 개발된 다양한 방법의 실험들은 후성유전체 연구 분야에서 선도적인 연구가 될 것 이라고 생각한다.
