In contrast to easlier reports of complete translocation, apocytochrome c is found to be only partially translocated across the bilayer of PS vesicles entrapped with trypsin. A 2.5 kDa polypeptide segment of C-terminal area of apocytochrome c (80-104) remains attasched to the bilayer after the rest of the apocytochrome c is digested by internal trypsin. Digestion of vesicle-bound apocytochrome c by externally added trypsin also yielded a protected segment in the C-terminal area (74-104). These observations suggest that apocytochrome c spans the bilayer when it binds to PS vesicles and there is a partial translocation when it is being digested by either external or internal trypsin. Externally added apocytochrome c was hydrophobically labeled with [I] TID and treated with endoproteinase Arg C. The results indicates that the N-terminal area (1-38) penetrates the bilayer. The vesicle-bound apocytochrome c was also digested with aminopeptidase showing that the N-terminal end is exposed to the outside. A dynamic interaction between apocytochrome c and vesicles and a possible partial translocation model are discussed.
이전의 완전한 전위에 대한 결과와 대조적으로, apocytochrome c는 trypsin이 들어있는 PS vesicle의 이중막을 부분적으로 통과하는 것으로 밝혀졌다. Apocytochrome c의 C-terminal 부분의 2.5 kDa 조각(80-104)이 내부 trypsin에 의해 apocytochrome c의 나머지 부분이 잘린 후 이중막에 남아 있었다. 외부에서 주어진 trypsin에 의해 vesicle-bound apocytochrome c가 절단 되면 C-terminal area (74-104)가 보호되었다. 이 관찰에서 apocytochrome c가 PS vesicle에 붙어서 이중막을 통과하고 안팎의 trypsin 에 의해 잘릴때 부분적으로 전위된다는 것을 알 수 있다. 외부에서 주어진 apocytochrome c가 소수성 표지되고, Endoproteinase Arg C에 의해 잘리었다. 그 결과 N-terminal area도 막을 통과하는 것이 밝혀졌다. Vesicle-bound apocytochrome c가 Aminopeptidase에 의해 잘리었고, 이것은 N-terminal end가 외부로 노출 되어있음을 나타낸다.
