The hybridoma lines that secrete anti-ESH monoclonal antibodies were cloned by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) after fusion of mouse SP2/0-Ag 14 myeloma cells with spleen cells isolated from BALB/c mice that have been immunized with Eriocheir sinensis hemocyanin (ESH), one of arthropod hemocyanin. Anti-ESH monoclonal antibodies were identified to secrete Ig Gl by double gel immunodiffusion. In the case of crossreactivity test with Keyhole limpet hemocyanin (KLH), one of molluscan hemocyanin, anti-ESH monoclonal antibodis and anti-KLH monoclonal antibody showed no affinity each other in ELISA.
Insulin-like growth factor II (IGF II) fusion protein was purified by eluton method from SDS-PAGE and the clones that secrete anti-IGF II fusion protein antibodies were selected in HAT medium. And anti-IGF II monoclonal antibodies were identified to secrete Ig Gl by double gel immunodiffusion.
절지 동물의 산소 운반 단백질의 일종인 참게 헤모시아닌(Eriocheir sinensis hemocyanin, ESH)에 대한 단일 클론 항체를 BALB/c 생쥐계에서 생성하여 효소 면역 검출법으로 확인 하였다. 만들어진 단일 클론 항체는 Ig Gl isotype을 갖는 항체임을 Ouchterony test 로 알 수 있었다. 그리고 Keyhole limpet hemocyanin(KLH) 단백질과 참게 헤모시아닌 단백질(ESH)을 가지고 ESH에 대한 항체와 KLH 에 대한 항체를 사용하여 서로의 상호 반응성을 조사한 결과 각각에 대해 친화력이 없음을 면역 효소 검출법으로 확인하였다. 대장균에 clonning 된 Insulin like growth factor II(IGF II) fusion 단백질을 SDS-PAGE 로부터 분리 정제하고, 이 단백질을 항원으로 이용하여 이 단백질에 대한 단일 클론 항체를 ESH에 대한 단일 클론 항체를 만드는 방법과 같은 방법으로 생성 하고 효소 검출법 으로 확인하였다. 또한 만들어진 단일 클론 항체는 Ouchterony test로 확인한 결과 Ig Gl isotype 을 갖는 항체 이었다.
