By using an radioimmune assay (RIA), two hybridoma lines that secrete monoclonal antibodies were selected after fusion of mouse $sp^2$/o myeloma cells with spleen cells isolated from Balb/c mice that have been immunized with kyehole limpet hemocyanin (KLH), one of molluscan hemocyanin. They were identified to secrete Ig Gl by double gel immunodiffusion and have no affinity to one of arthropod hemocyanin, portunus trituberculatus hemocyanin, by RIA.
Enzyme linked immunosorvent assay (ELISA) was compared with RIA and showed that ELISA is more sensitive than RIA at least in our laboratory condition.
E. coli ribose binding protein (RBP) was purified by one step DEAE-Sephadex chromatography and by using ELISA 6 positive wells that secrete anti RBP antibodies were selected in HAT medium. One of them was identified as Ig Gl and the rest are on the study. According to the average hydrophilicity values of RBP there might be at least eight antigenic determinants and its signal sequence is foled to the inner space. This fact suggest that monoclonal antibodies against RBP can detect any conformational change between precursor and mature form of RBP.
연체동물의 산소운반 단백질의 일종인 keyhole limpet hemocyanin (KLH) 에 대한 단일 클론 항체를 Balb/c 생쥐계에서 생성하여 그 특성을 밝힌 다음 갑각류중 계의 산소 운반 단백질인 Portunus trituberculatus hemocyanin (PTH) 과의 친화력을 방사능 면역 검출법으로 조사하였는데 어떤 친화관계도 발견할 수 없었다.
그리고 효소면역 검출법과 방사능 면역 검출법을 그 민감도에 관심을 두고 백분율로 환산해 본 결과 적어도 우리 실험실에서의 기준으로는 효소면역 검출법이 그 민감도에 있어서 우수한 것으로 나타났다.
또, 대장균의 5탄당 전달 단백질을 한단계 과정의 chromatography 로 거의 순수하게 분리해 낸 다음 그에 대한 단일 클론 항체를 만들었는데, 그 중 한가지는 Ig Gl 형태임이 밝혀졌다. 아미노산 서열에 의한 5탄당 전달 단백질의 항원 결정기는 약 8개로 예상되며 그 단백질이 세포밖으로 나가는 과정에서 일어나는 단백질 구조변화를 찾아 내는데 있어서 위의 얻어진 단일 클론 항체들이 기여 할 것으로 기대된다.
