A inulase producing spore-former had been isolated, identified as a $\underline{Bacillus}$ $\underline{subtilis}$ and used as gene donor. The purified genomic DNA from $\underline{Bacillus}$ $\underline{subtilis}$ was digested with PstI and eluted by electrophoresis to four fraction according to the size. Fractions 1, 2, 3, 4 corresponding average 13.5 kb, 3 kb, 1.5 kb, 0.6 kb in size. Fractions 1 and 2 were ligated with a vehicle, pUC9 which was digested with PstI and dephosphorylated with CIP. The ligated DNA was transformed into competent $\underline{E.}$ $\underline{coli}$ JM 103 cells and spreaded on the tetrazolium plates. After incubation at $37^\circ{C}$ for 24 hours, one transformant that formed large and red color colony was selected and assayed for inulase activity. That transformant showed 0.8 times less inulase activity than the original $\underline{Bacillus}$ $\underline{subtilis}$ JU 70. The insert size of the plasmid carrying the inulase gene was 2.1 kb. The restriction map of recombinant plasmid was constructed using restiriction enzymes AvaII, EcoRI, HindIII, PstI, SacI et al.
고초균에서 분리한 chromosomal DNA를 제한효소 PstI으로 자르고 크기별로 분리한 후, 역시 제한효소 PstI 과 CIP로 처리된 운반체 pUC9과 연결시켜 재조합 DNA 를 만들고 이것을 대장균에 형질변화 시켰다. 형질변환된 대장균을 M9 tetrazolium 배지에 뿌린 후 $37^\circ{C}$ 에서 24 시간동안 배양하여 크고 붉은 colony를 형성하는 형질변형균을 찾아내었다. 형질변형균과 고초균의 이눌라제 (B-fructofuranosidase) 활성도를 비교한 결과 형질변형균은 고처균의 80 % 해당하는 이눌라제 활성도를 나타내었다. 재조합 DNA 에 들어가 있는 DNA 단편의 크기는 2.1 kb였다. 제한효소를 이용하여 DNA 단편의 유전자 지도를 만들어 본바, AvaII, EcoRI, HindIII, SacI, XhoI 의 제한효소 자리를 갖고 있음이 밝혀졌다.
