The microorganism which is able to grow in oil was isolated and identified. This microorganism was identified as $\underline{Mucor}$ sp. and accumulated lipase in culture fluid.
The factors affecting growth and lipase production by $\underline{Mucor}$ sp. has been investigated. $\underline{Mucor}$ sp. showed maximum lipase production at 30℃ and at PH 7.0 in 3days. Aeration stimulated the growth and lipase production. The medium supplemented with olive oil stimulated the maximum production of lipase, whereas carbohydrate reduce the growth and remarkably decreased the lipase production. Among the nitrogen sources tested, soy bean meal yielded maximum lipase production at 2%. The extacellular lipase was purified treating the ammonium sulfate precipitation, and applying the chromatography on Sephadex G-200 and Sephadex G-100 columns. The enzyme was purified 52 fold with the yield of 18%. The enzyme showed its optimum PH and temperature at 7.0 and 30℃, respectively.
The enzyme activity was enhanced slitely by $CaCl_2$, while $ZnCl_2$, $FeCl_3$, and $HgCl_2$ were inhibitory. The bile salts showed either an activating or inhibiting effects, depending on the concentration. The effect of organic solvent on the stability and catalytic activity of the $\underline{Mucor}$ lipase has been examined. The solvents examined were 5 hydrocarbons and 3 ethers. The result revealed that isooctane is superior to the other solvents examined. Among the triglycerides tested, triolein was hydrolyzed most easily by the enzyme as compared with tributyrin and triacetin.
영양조건이 극히 나쁜 기름속 에서도 성장할 수 있는 미생물을 순수 분리하여 동정하였다. 이 미생물은 $\underline{Mucor}$ sp. 임이 밝혀졌으며 성장 배지에서 비교적 다량의 리파제를 생성했다. 기초 배지에서 여러 영양원을 변화시켜 리파제의 생성 능력을 조사하고 가장 적합한 성장 배지를 결정한 후 이 $\underline{Mucor}$ sp.의 리파제를 분리, 정제하였다. Ammonium sulfate침전과 gel filtration 방법을 사용하여 54 배의 정제된 효소를 얻었으며 이때의 수율은 18% 였다. 이 효소는 pH 7.0, 온도 35℃에서 가장 높은 역가를 보였다. 이 효소의 역가에 미치는 여러 금속 이온을 조사한 결과 $CaCl_2$는 약간의 역가의 증가를 보여준 반면 $FeCl_3$, $ZnCl_2$, $HgCl_2$는 크게 역가를 감소 시켰다. 담즙산은 농도가 낮을때는 효소의 격가를 크게 증진시키지만 농도가 높을때 에는 효소의 역가를 크게 감소시켰다. 가장 높은 역가를 보인 담즙산의 농도는 $1.0\times10^{-3}M$ 였다. 유기용매를 도입해 기름을 가수분해 시키기 위해서 여러 유기 용매내 에서 효소의 안정성과 역가를 측정 했다. 이 결과 isooctane이 가장 적합한 유기용매로 밝혀졌다. 이 효소는 천연 기름과 합성된 triglyceride를 모두 분해할 수 있었으며 길이가 긴 불포화 지방산에 높은 친화력을 보였다.
