For the separation of enzyme, the characteristics of affinity chromatography was studied. The system employed Sepharose CL-4B as the gel matrix, 4-phenylbutylamine as a ligand and α-chymotrypsin as a solute.
Moment analysis was used to determine the retention time in a column, in which the longitudinal dispersion in the mobile phase, the radial dispersion inside the porous spherical gel beads and the sorption on the internal surface of the gel bead are simultaneously taking place.
In the constant pattern assumption the averaged volumetric coefficient of mass transfer was obtained and the breakthrough curve could be calculated by the implicit scheme of finite difference method.
To analyse the effect of pH on the retention time, an ionization model was incorporated into the chromatographic model. Dependence of adsorption equilibrium constant and the retention time on pH were investigated. From the experimental data the approximate pK values would be obtained. Also the dependence of retention time on the ligand concentration was investigated.
효소를 분리하기 위한 목적으로 친화도 크로마토그래피의 특성에 대한 연구가 수행되었다. 본 실험계에서 gel matrix 로는 Sepharose CL-4B 가, ligand 로는 4-phenylbutylamine 이, 그리고 흡착질로는 α-chymotrypsin 이 사용되었다.
유동상에서의 축방향의 분산과, 다공성의 구형 gel bead 안에 서의 반지름 방향의 분산, gel bead 내부 표면에서의 흡착이 동시에 일어나는 column 에서의 체류시간을 결정하기 위해서 moment analysis 가 사용되었다.
constant pattern 가정하에 부피에 기준을 둔 평균 물질 전달 계수가 얻어졌고 finite difference method 의 implicit scheme 을 사용하여 breakthrough 곡선을 얻을 수 있었다.
pH 의 체류 시간에 대한 영향을 분석하기위해 ionization 모델을 크로마토그래피 모델에 도입하였다. 이 모델을 사용하여 흡착 평형 상수와 체류 시간의 pH 의존성을 조사하였다. 또한 실험 결과로부터 대략적인 값을 결정할 수 있었으며 체류시간의 농도의존성도 아울러 조사되었다.
