Effects of T-2 toxin were studied in primary cultures of adult rat hepatocytes. Hepatocytes were isolated by a collagenase perfusion technique and cultured as monolayer in serum-free media for 48 hours.
Uptake of cardiac glycoside (ouabain), hormonal induction of α-aminoisobutyric acid (AIB) uptake and tyrosine aminotransferase (TAT) activity were used as the parameters to determine cytotoxicity.
No significant lethality was observed after 6 hours treatment of 100 ng T-2 toxin/ml.
At does from 10 to 100 ng/ml, T-2 toxin inhibited the induction of AIB transport and TAT activity when T-2 toxin was added simultaneously with hormones.
It also exerted inhibitory effects when added at 6 hours prior to the hormonal treatment, and removed from medium.
Meanwhile, T-2 toxin did not show any inhibitory effects on ouabain transport system.
The results of this study suggest that T-2 toxin caused abnormality to liver functions within the testing period, but it does not due to membrane damage and lethal effect. It seems likely that T-2 toxin is a strong inhibitor of protein synthesis in rat hepatocytes.
곰팡이에 의해 오염된 사료나 식품에서 생성되는 T-2 독소가 1차 배양 간세포에 어떤 영향을 미칠 것인가에 대해 연구했다. 그 독성을 탐지 하려는 지표로는 생존도 검사, ouabain 의 세포 흡수검사, 호르몬에 대한 간세포의 반응도 검사 등을 선택하였다.
100 ng/ml 의 농도로 독소를 6시간 처리했을때 이 독소는 간 세포의 생존도에 영향을 미치지 못했다. 그러나 10 에서 100 ng/ml 의 독소를 6시간 처리 하였을때 이것은 글루카곤 및 덱사메타손에 의해 유도되는 아미노산 유입량을 농도에 따라 감소 시켰다. 이런 현상은 또한 덱사 메타손에 의해 유도되는 tyrosine aminotransferase 활성에서도 나타 났다. 호르몬에 의해 유도시키기 6시간 전에 이 독소를 처리 하였을때도 아미노산의 유입이나 효소 활성에 비슷한 억제 효과를 나타내었다. 그러나 ouabain 의 유입 양은 100 mg/ml 로 6시간 또는 24 시간 처리시 에도 영향을 받지 않았다.
위의 사실들은 호르몬과 관련된 간기능에 대해 T-2 독소는 억제 효과를 나타내며 이 효과는 적어도 6시간 동안은 비가역적 이라는 것을 말해준다. 또한 이 현상은 세포막의 손상에 의하지 않는다는 것도 나타내준다.