For a long time, the antibiotic of lactic acid bacteria had been discussed. There were two or more factors to influence the antimicrobial activity of fermented lactic cultures. It was about ten years ago to identify an antibiotic produced by L. acidophilus. But the investigation of its nature has not been progressed noticibly. Acidophilin, produced by L. acidophilus, was one of these antimicrobial agents of lactic acid bacteria. It could be partially purified by Shahani et al., and some of its natures were shown by them.
It was expected as an efficient drug and/or anticeptic of food because it might be nontoxic and non-resistent to human body. So it is a fine object to purify acidophilin and to analyze its chemical natures and biological properties.
In this research, acidophilin was purified by improved methods of Shahani's and Hamdan's. Lactic acid-free and pure acidophilin was purified by Sephadex and silica gel column chromatographies followed by thin-layer chromatography.
For the analysis of the chemical structure, ultra-violet, infrared, and NMR spectra were employed and several crews of its structure could be suggested. Some of chemical properties, pH stability, thermostability, and polarity were also revealed.
In vitro test of the antimicrobial activity was carried out, so the antimicrobial susceptiblities against several microorganisms were suggested.
Through the experiment like these, the properties of acidophilin is not exactly correlated with the results of Shahani's and Hamdan's. But this is the first one that pure lactic acid-free acidophlin is researched. It is not acidic and hygroscopic. Its UV absorbance maximum is at 243 nm.
오랫동안 유산균이 생성하는 항생물질은 논의의 대상 이었다. 이러한 유산균 배양액엔 두가지 이상의항균작용 영향 인자가 존재 하였다. L. acidophilus 에서 항생물질이 생산 된다는 사실은 약 10년전 에야 비로소 확인되었다. 그러나 아직도 이 항생물질의 본체에 대해선 그 연구가 뚜렷하게 진척되지 않고 있었다.
L. acidophilus 가 생성하는 항생물질인 acidophilin 은 이와같은 유산균의 항생물질 중의 하나이다. 이는 Shahani group 에 의해 처음으로 부분적으로 분리되어 그의 특징들이 밝혀졌다.
이 항생물질은 인체에 무독성 내지는 무 저항성일 것이라고 추정되기 때문에 유효한 약물로써 그리고 식품의 방부제로써 기대를 모았다. 그러므로 acidophilus 을 분리하여 이의 화학적 본질과 생물학적 특징을 밝혀내는 연구는 훌륭한 연구과제이다.
본 연구에서는 Shahani 와 Hamdan 의 분리 방법을 개조한 분리 방법을 사용하여 acidophilin 을 분리하였다. 유산이 완전히 배제된 순수한 acidophilin 을 Sephadex 와 silica gel column chromatography 에 이은 thin layer chromatography 를 통해 분리할수 있었다.
이에 대한 화학 구조 분석을 위해, ultra violet, infrared, 와 NMR spectroscopy 가 행하여 졌으며 이의 구조에 대한 몇가지 단서를 제시할수 있었다. 또한 pH 안정성, 열 안정성과 극성등 몇몇 화학적 특성을 밝혀 내었다. 항균작용에 대한 in vitro 시험을 통해 여러가지 균주에 대한 항균도를 측정하여 제시 하였다.
이상과 같은 실험을 통해 acidophilin 의 특성은 Shahani 와 Hamdan 의 결과와는 상당한 부분에서 일치하지 않고 있음을 알았으나 이러한 문제는 그 순도에 있어서 부분적인 분리에 그쳐 lactic acid 가 혼입된 상태 이었기에 나타난 것임도 확인하였다. 즉 가장 최초로 lactic acid 가 제거된 상태에서 순수한 acidophilin 이 된것을 확인 하였다. 이는 산성도 아니고 hygroscopic 하지도 않았으며 U.V. 흡광 극대치는 243 nm 에서 있었다.
