The culture time of mycelia for immobilization was determined to 60 hour, time to give maximum mycelial weight.
By immobilized cell with polyacryamide, k-carrageenan and polyurethane, cellulase production was tested in flask culture. k-Carrageenan and polyurethane gave good results.
The condition of immobilization with carrageenan was optimized in flask culture. The results are obtained as 4% carrageenan and 20% cell concentration. And activation of immobilized cells with carrageenan and polyurethane was tested in flask culture. About 30 mg increase in dry weight was shown for both matrices and optimum activation time was shown to be 4 day.
Cellulase production by immobilized cells with carrageenan and polyurethane were carried out in air-circulated fermentor. Carrageenan entrapped cell was shown to be more efficient. Therefore, by using carrageenan entrapped cell continuous production of cellulase was performed in various dilution rate. Steady state was reached after about 5 times of residence time. Maximum productivity of cellulase was 28 IU/1/hr in 0.05 $hr^{-1}$ of dilution rate. In comparision with single stage continuous system, about 30% increase was shown in immobilized cell system.
In 1% latose medium batch operation was also performed.
In 6 day final activity was obtained as 0.4 IU/ml.
Trichoderma viride QM9414의 균사체를 polyurethane, polyacrylamide, kappa-carrageenan 의 여러 담체에 고정화 시켜 cellulase 효소의 생성을 조사하였다. 배지의 탄소원으로서 1% pure cellulose (Solka Floc SW40)와 lactose 를 사용하였으며, 배양온도는 30℃, pH는 회분식 발효의 경우에 4.0, 연속식 발효의 경우 에 5.0 으로 조절하였다. 고정화에 적합한 회분식 발효 시간을 결정하기 위해 균사체의 회분식 발효가 이루어졌으며, 그 결과 최대의 균사체 농도를 주는 발효시간은 60 시간으로 나타났다. 그리고 먼저 kappa-carrageenan 의 고정화 최적조건을 결정하는 실험이 이루어졌으며, 4% carrageenan 과 20% 균사체 농도를 사용한 경우가 가장 좋은 결과를 주었다.
여러 담체를 사용하여 flask 배양을 한 결과에 의하면 담체로서 kappa-carrageenan 과 polyurethane 이 좋은 것으로 나타났다. 또한 고정화된 담체내의 균사체 농도를 증가 시키기 위해 k-carrageenan 과 polyurethane 담체의 활성화 실험이 포도당 배지를 사용하여 flask 배양에서 이루어졌으며, 4일 경과후 균사체 농도가 최고점에 도달하였다. 이렇게 활성화된 고정화 균사체를 사용하여 공기 회전식 발효조 에서 회분식 발효와 연속식 발효가 이루어졌다. 회분식 발효의 결과에 의하면, 담체로서 kappa-carrageen이 좋은 것으로 나타났으며, 이 kappa-carrageenan 을 사용하여, 여러 희석율에서 연속식 발효가 이루어졌다. 최대 cellulase 생산성은 희석률이 0.05 $hr^{-1}$ 에서 28 IU/l/hr 로 나타났다. 이 결과는 이제까지 연속식 발효에 의한 cellulase 생산성에 비해 약30% 증가한 결과이다.
Lactose 배지에서 고정화 균사체를 사용한 cellulase 생성 역시 이루어 졌으며, 회분식 발효의 결과에 의하면 6일 경과후 0.4 IU/ml 의 효소 활성을 나타내었다.
