An intracellular enzyme which can lyze chains of bacterial cells into shorter filaments was extracted from cells of Lactobacillus bulgaricus NLS-4 and tried to use in plate count of lactic acid bacteria growing in milk.
Since the enzyme seemed to be bound to cell wall a treatment with five moles of Licl was needed for an effective extraction. The enzyme activity showed optimum pH at 6.0 and dechained the cells most effectively at this pH. It was also found that the enzyme produced by one strain of L. bulgaricus could dechain the cells of not only its own strain but other strains such as streptococcus lactis.
When culture suspensions of lactic acid bacteria were treated with the enzyme just before the dilutions for plating out, higher number of colnies per ml of culture suspension were observed. Treating culture suspensions with 60μg/ml of enzyme for 30 minutes under optimum growth temperature of the subjected strain gave best results in plate counts.
The enzyme and technique obtained were applied in the plate counts of L. bulgaricus and S. lactis in milk cultures. The treatment of culture suspension with the dechaining enzyme during the process of standard plate count increased the values of cell concentration by three to four folds compared to that with the conventional plate count. It was concluded, therefore, that the dechaining enzyme extracted from L. bulgaricus NLS-4 can be utilized for the standard plate count of lactic acid bacteria, specially in milk cultures where no other quantitative method for cell growth are available.
유제품 에서 미생물의 성장은 dechaining enzyme을 사용하여 더욱 정확하게 측정될수 있었다.
Dechaining enzyme은 긴세포 사슬을 짧게 잘라 줌으로써 유산균 에서 평판배양 계수에 의한 성장 측정을 증진 시켰다.
Dechaining enzyme은 5 M LiCl 을 써서 L. bulgaricus NLS-4의 세포막으로 부터 추출하였다. 이 효소는 pH에 민감함이 밝혀졌으며 pH 6.0에서 가장 활발한 활성을 나타내 었다. Dechaining 현상은 효소의 농도에 따라 증가되며 이때 평판 배양 계수를 증진시켰다.
이 효소를 유산균의 평판배양 계수법에 적용하기 위하여 dechaining의 최적조건이 연구 되었다. 이때 효소 활성의 최적온도는 그 균의 최적 생장 온도에서 나타나는 것으로 밝혀 졌으며 L. bulgaricus 의 경우에 37℃에서 S. lactis의 경우에는 30℃에서 나타났다.
이 효소가 반응하는데 필요한 시간은 두 경우 모두 30분이었다. Dechaining 시 교반은 200rpm 이 적절하였다. 평판배양 계수법을 이용해 유산균의 성장을 측정한 결과 대수기 에서 L. bulgaricus 에서는 4배, S. lactis 에서는 3배 가량 증가 된 값이 나왔다.
