Out of Ⅱ organic acid producing strains isolated from fruits, soil, and air, one strain was selected for the study of critic acid fermentation using Korean local raw materials. The organism was identified as $\underline{Aspergillus}$ $\underline{niger}$.
When $\underline{A}$. $\underline{niger}$ was shaked at 30℃ in a cotton plugged 500 ml Eronmeyer flask with 100ml of Sakaguchi's medium containing 10% of glucose (Difco), 0.6% of peptone, and mineral, citric acid was produced at the level of 17 gram per liter in 14 days. The fermentation period of 14 days could be shortened to 8 days by reducing the liquid volume in the flask to 50ml allowing a better aeration. The citric acid production was found to be increased to 20 gram per liter if the peptone content in the medium reduced to 0.45%. The product formation was further increased to 35 gram per liter level when the glucose (Difco) content raised to 14%. The Difco glucose could be replaced by Korean local commercial glucose brands without significant change in the citric acid yield.
When the contaminated minerals were removed from the local glucose by Ambelite IR-120 and peptone by potassium ferrocyanide followed by readjustment of ferric ion content in the medium to 10 mg per liter, the citric acid formation reached 53 gram per liter, a production level of three times higher than with the original Sakaguchi's medium.
한국산 원료로 미생물의 발효에 의한 구연산을 생산 할 목적으로 자연계에서 11주의 유기산 생성 균을 분리하였으며, 그 중에 액침배양에서 구연산 능력이 큰 것을 선정하였어 분류 결과 $\underline{Aspergillus}$ $\underline{niger}$로 동정하였다.
솜 마개를 한 500ml Erlenmeyer flask속에 100ml Sakaguchi배지를 넣고 이 균주를 접종하여서 30℃에서 14일 동안 진탕 배양한 결과 17g/ℓ의 구연산을 얻었다. Sakaguchi배지가 갖인 0.6%의 peptone량을 0.45%로 하면 구연산 생산량이 20g/ℓ로 늘어났고 다음에 포도당을 10%에서 14%로 증가시키므로써 구연산 증가량이 15g/ℓ로 늘어나서 35g/ℓ가 되었다.
발효배지를 변화시켜서 통기효과에 관한 것을 실험한 결과 구연산 발효에는 많은 산소를 요구하고 있으며 발효배지 100ml 대신50ml하여 실험한 결과 발효 기간을 6일간 앞 당길 수가 있었다.
한국적 자원인 제품 포도당을 사용하였을 때 8일째 있어서 구연산 발효에 제품간의 오차는 없었으며 평균 38g/ℓ의 구연산이 생성되었다.
구연산 생성에 필요한 절대량 ferric ion의 량을 구하기 위해서 포도당과 peptone를 처리한 후에 구연산 생성이 가장 많이 생성되는 것은 10mg/ℓ로써 이때 원래의 Sakaguchi배지의 구연산 생성에 비해서 3배나 많은 53g/ℓ의 구연산이 생성됐다. 이때배지 조성은 Ambelite IR-120을 처리한 제품 포도당 $(Y)\cdot140$g/ℓ, Potassium ferrocyanide 을 처리한 $peptone\cdot4.5$g/ℓ, $K_2HPO_4\cdot0.3$g/ℓ, $MgSO_4\cdot7H_2O\cdot0.15$g/ℓ, ferric ion·10mg/ℓ, Zn acetate·10mg/ℓ 이었다.
