Several genes for the export of protein in E.coli, including secA, secB, secE, secY, have been identified by genetic approach. Most genes except secB are essential for cell viability. SecB, however, is nonessential and plays a role as a chaperone in protein export. It involves in the export of only a subset of proteins. Previous studies reported that secB::Tn5 strain did not show any export defect of ribose-binding protein(RBP), thus RBP is regarded secB-independent. Here it is shown that the export of RBP requires intact sec genes, and even secB in abnormal physiological conditions. At nonpermissive temperature, both secA51(Ts) and secY24(Ts) strains showed the accumulation of precursor RBP suggesting that the SecA and SecY involved in the export of ribose-binding protein. Moreover, prlA(secY) and prlD(secA) strains were able to suppress a signal sequence mutation, rbsB103. SecB, however is not absolutely required for the export of wild type, but, is necessary for the slowly exporting mutants. All RBPs with defective signals tested were weakly secB-dependent. In a situation where cells were treated with uncoupler, CCCP, the export of wild-type RBP was also secB-dependent. When SecB was present, nonfunctional GroEL did not affect the export of RBP. These results suggest that at least in the posttranslational translocation, SecB participates in the export of RBP.
SecB 단백질이 처음 발견되었을 때, secB::Tn5를 이용하여 단백질의 수송에 대한 SecB 의 관련성을 조사하였다. 리보스 결합 단백질은 SecB 의 존재에 관련 없이 정상적인 수송을 보였으며, 이 단백질의 수송 경로는 SecB 에 의존하는 다른 단백질과는 다를 것으로 여겨졌다. 그러나, 수송에 필수적인 단백질들로 여겨졌던 SecA, SecY 단백질을 이용하여 리보스 결합 단백질도 수송이 이루어짐이 재확인되었다. 또한, SecB 단백질의 관련성 여부를 재조사했을 때, 야생형 리보스 결합 단백질은 SecB 와 무관하게 수송이 이루어짐이 확인되었으나, 돌연변이를 가진 단백질일 경우 SecB 단백질이 관련됨을 밝혔다. rbsB103 신호 배열 돌연변이를 이용하여 복귀 돌연변이들을 분리할 수 있었는데, 이 복귀 돌연변이들의 늦은 수송을 이용하여, 비교적 약한 SecB 의 결합을 조사할 수 있었다. 신호 배열 돌연변이가 존재하는 모든 경우에 SecB 가 수송에 관련됨이 보여 졌고, 심지어 야생형 단백질이 CCCP 에 의하여 수송이 저해 될 경우에도 미약한 SecB 의 결합이 확인되었다. 이러한 결과는 신호 배열이 정상일 경우, 리보스 결합 단백질의 수송은 SecB 가 아닌 다른 단백질에 의해 조절되고 있으나, 신호 배열의 결함에 의해 정상적인 빠른 수송이 저해되고 결국 SecB 의 도움을 받는 늦은 수송 경로를 통해 수송이 이루어짐을 강력히 암시한다. 또한, 신호 배열 돌연변이에 대한 복귀 돌연변이에 관한 연구가 폭 넓게 이루어 졌는데, 이 복귀 돌연변이들(rbsB50VE, rbsB27AT)은 합성된 전구체 단백질의 folding을 약 13 또는 19배씩 늦추는 것으로 드러났다. 한가지 가능성은 folding 이 늦어짐에 따라 전구체 단백질이 수송에 적합한 형태로 오래 유지되고 이 현상이 결국은 오랜 시간에 걸쳐, 단백질의 수송이 일어날 수 있게 해 주는 것이다. 실제로 보통의 경우 약 5분 이내에 단백질의 수송이 거의 멈추지만, 복귀 돌연변이를 가진 전구체는 심지어 1 시간에 걸쳐 지속적인 단백질 수송을 보였다. 이러한 현상에도 불구하고 여전히 복귀 돌연변이의 다른 역할이 있을 것으로 추측하고 있다. 이러한 가능성은, 서로 다른 복귀 돌연변이 (rbsB27AT, rbsB36VE)들을 새로운 신호 배열 돌연변이(rbsB(-14AE))와 재조합했을 때, 두가지의 수송 정도가 크게 차이가 난다는 사실로부터 유추할 수 있었다. 만약 복귀 돌연변이들이 전구체의 folding 만 저해시킨다면, 초기의 수송 (5분 이내) 정도는 두 복귀 돌연변이에서 거의 비슷해야 한다. 또한, 복귀 돌연변이들이 3차 구조에서의 위치가 모두 N-domain 이 있다는 사실이 단백질의 folding 과 더불어 신호 배열 돌연변이와의 관계가 중요함을 암시한다.
