Escherichia coli RNase P is a processing enzyme which cleaves tRNA precursors at the 5'-end of the tRNA sequence. It is composed of protein component, C5 protein, and RNA component, M1 RNA. M1 RNA synthesized from a ColEl-related plasmid, which harbors the rnpB gene encoding M1 RNA, was accumulated in E. coli strain A49 carrying the thermosensitive mutation in the rnp A gene encoding C5 protein at nonpermissive temperature. This accumulation of M1 RNA accompanied the accumulation of two small RNAs in the A49 cells. They were designated as RNA X and RNA Y in diminishing size. Their nucleotide sequences were determined by the enzymatic method. Analysis of the RNA sequences showed that RNA X and RNA Y are composed of 96 and 67 nucleotides, respectively and related with RNA I, which is the negative controller of ColE1 plasmid replication. Surprisingly RNA X has the same sequences of RNA Y but differs in containing an extra 29 nucleotides at the 5' end. These results indicate that RNA X and RNA Y are originated from the ColE1-related plasmid, and suggest that a defect in RNase P function by the rnpA49 mutation is responsible for accumulation of these RNAs, implying the possible involvement of RNase P in controlling the replication of ColE1-type plasmids.
대장균의 리보핵산가수분해효소 P (RNase P)는 tRNA 염기 서열의 5' 말단에서 전구체 tRNA를 절단하는 가공효소이다. 이 효소는 C5 단백질이라고 부르는 단백질 성분과, M1 RNA 라고 부르는 RNA 성분으로 구성되어 있다. C5 단백질을 암호화하는 rnpA 유전자에 온도 감수성 돌연변이가 일어난 대장균인 A49 세포내에서 M1 RNA를 암호화하는 rnpB 유전자가 포함된 ColE1 형 플라스미드로부터 합성된 M1 RNA가 고온일때 축적되었다. 이 A49 세포내에서 이와같은 M1 RNA의 축적과 더불어 두개의 작은 RNA들이 축적되었다. 두개의 RNA는 크기에따라 큰 RNA는 RNA X, 작은 RNA는 RNA Y라고 명명하였다. 그들의 누클레오티드 배열순서는 효소를 이용한 RNA 염기 결정법을 이용하여 결정하였다. 누클레오티드 배열순서를 분석한 결과, RNA X와 RNA Y는 각각 96과 67개의 누클레오티드로 구성되어 있으며, ColE1 플라스미드가 복제될때 역조절작용을 하는 RNA I과 염기서열면에서 일치한다는 것을 알 수 있었다. 특이한 사실은, RNA X가 5' 말단에서 29 뉴클레오티드를 여분으로 가지는 것을 제외하고는 RNA Y와 동일한 염기서열을 가지고 있다는 것이다. 이러한 결과로 부터 RNA X와 RNA Y가 ColE1 형 플라스미드로부터 생성되었다는 것을 알 수 있고, 이 RNA들의 축적은 rnpA49 돌연변이에 의한 리보핵산가수분해효소 P (RNase P) 기능의 결함 때문에 일어났다는 것을 예상할 수 있었고, 이러한 사실은 리보핵산가수분해효소 P (RNase P)가 ColE1 형 플라스미드 복제를 조절하는데 참여하고 있다는 것을 암시하여 준다.