YAP (Yes-associated protein) is regulated negatively through the phosphorylation of YAP S127 by Hippo pathway and Akt pathway. These negative regulations occur at each specific circumstance. Hippo pathway inhibits YAP when differentiation signal or contact inhibition induced, and Akt inhibits YAP when cells get survival signal. However, whether YAP at cycling cells-like cancer cell line is regulated or not, is not known. Here, I show that the phosphorylation profile of YAP S127 which controls its local distribution and activity is changed through cell cycle progression. Especially, the level of phosphor-S127 YAP is decreased in G1/S phase and gradually increased as cells progressed to G2-M phase after thymidine release in HeLa cells. On the contrary, nuclear YAP is increased in G1/S phase. And it was generalized through Nocodazole synchronization system in HeLa cells and serum starvation system in NIH 3T3 cells. I present whether the various contexts of YAP can induce the changes of normal cell cycle profiling and progression. So I transfected mutants of YAP and investigated the cell cycle profiling. To understand in more detail, I synchronized YAP mutant expressing cells to G1/S phase by thymidine block and investigated the cell cycle progression.
YAP (Yes-associated protein)은 전사 공동 작용자 단백질로써 세포 사멸과 세포 분열의 양 신호 전달에서 작용하는 것으로 알려져 있다. 이 단백질은 세포내 위치변화를 통해 그 활성을 주요하게 조절 받는다. 전사 작용자와 만나서 활동하기 위해서 전사 공동 작용자 단백질은 핵 안에 위치해야 하는데 YAP은 핵 안에서 세포질로 이동됨으로써 그 활성을 저해받는다. YAP의 세포내 위치는 YAP의 127번째 serine 아미노산의 인산화 여부에 따라 결정된다. 127번째 serine 아미노산이 인산화된 YAP은 14-3-3 단백질과 붙어서 세포질로 이동되고 머무르게 된다. 그럼으로 YAP의 127번째 serine 아미노산의 인산화는 YAP의 위치와 그에 따른 활성 조절에 중요하다.
이 연구에서 YAP의 127번째 serine 아미노산의 인산화가 G1/S 세포주기 시점에서 줄어드는 것을 처음으로 확인했고 이것이 YAP의 핵 안으로의 위치변화를 증가시킨다는 것을 보았다. G1/S 세포주기에 YAP이 핵 안으로 이동되는 것은 YAP의 활성이 세포주기 변화에 영향을 받고 또한 영향을 줄 수 있다는 가능성을 보여준다.
그래서 다음으로 세포에 YAP의 활성을 변화시키는 여러 DNA를 발현하여 YAP의 활성이 cell cycle에 미치는 영향을 연구하였다. YAP의 양이 증가하면 S 세포주기의 cell이 증가하는 것을 보았다. 그리고 활성을 저해받지 않는 YAP의 변이 DNA를 발현한 경우 G1/S 과도기가 빨라지는 것을 확인 할 수 있었다. 앞으로 세포 주기에 따른 YAP의 활성 변화를 야기하는 다른 조절 단백질들을 밝히고 그 작용 기작을 연구해 볼 가치가 있다.
