It is well known that the FOXO subfamily of forkhead transcription factors play a critical role in cell cycle, apoptosis, and energy metabolism, and are important for mediating effects of insulin and growth factors on gene expression as a downstream target of phosphatidylinositol 3-kinase (PI3K) and Akt. Here, I found a novel regulator of FOXO transcription factor, CRK, through genetic screening. Through coimmunoprecipitation analyses, I demonstrated that FKHR directly interacts with CRK in vivo, and that the C-terminal of CRK is needed for interaction with FKHR. Furthermore, I examined the regulation of CRK on FKHR; I revealed that CRK phosphorylates and thus, inhibits FKHR-dependent transcription in a kinase-activity-dependent manner, and that CRK induces the nuclear exclusion of FKHR by export mechanism using immunocytochemical analyses. Collectively, these findings establish CRK as a new regulator of FKHR.
Forkhead 전사 인자들 중 FOXO 그룹이 세포 주기, 세포 사멸, 그리고 에너지 대사에 있어서 중심적인 역할을 수행하고, PI3K-Akt 신호전달의 하위 단백질로서 인슐린과 성장 인자들이 유잔자 발현에 미치는 영향을 전달함에 있어서 중요하다는 사실이 잘 알려져 있다. 유전학적 스크린닝을 통하여 FOXO 전사 인자의 새로운 조절자인 CRK를 발견하였다. In vivo 상황에서 FKHR이 CRK와 직접적으로 결합하며, CRK의 카르복실 말단이 결합에 필요하다는 사실을 밝혔다. 더 나아가, FKHR에 대한 CRK의 조절작용을 조사하였다. CRK가 자신의 인산화 효소적 능력에 따라 FKHR을 인산화시키고, FKHR에 의한 전사를 막는다는 사실을 발견하였다. 그리고 immunocytochemistry 방법을 사용하여 CRK가 FKHR의 nuclear export를 촉진시킴으로서 FKHR의 nuclear exclusion을 유도한다는 사실을 발견했다. 요약하면, 이 결과들은 CRK가 FKHR의 새로운 조절자임을 알려주고 있다.
