Chinese Hamster Ovary (CHO) dhfr(-) cell line overexpressing anti-apoptotic protein Bcl-2, CHO dhfr(-) Bcl2. was developed for the establishment of recombinant CHO cells producing humanized antibody. CHO dhfr(-) Bcl2 stably overexpressed Bcl-2 protein without selection pressure and exhibited delay of apoptotic cell death in serum-free suspension culture. Established recombinant cell lines producing humanized antibody using CHO dhfr(-) Bcl2, CHO Bcl2-19-008 and CHO Bcl2-24-008, exhibited extended culture longevity in batch culture of serum-free suspension than control cell lines, CHO neo-04-008 and CHO neo-24-008. In stressful condition induced by 5mM NaBu addition, final MAb titers of CHO Bcl2-19-008 and CHO Bcl2-24-008 increased to $50㎍/mL^{-1}$, $11 ㎍/mL^{-1}$, which were five fold, three fold of final MAb titers in serum-free suspension culture, respectively. Compared with cell lines developed from CHO dhfr(-) Bcl2, CHO neo-04-008 and CHO neo-24-008 showed no significant increase of final MAb titer because rapid decline fo cell viablility after NaBa addition
항 세포예정사 특성을 갖는 Bcl-2 단백질을 과발현하는 CHO dhfr(-) 숙주 세포주, CHO dhfr(-) Bcl2를 인간화항체 생산을 위하여 확립하였다. CHO dhfr(-) Bcl2 숙주 세포주는 선별 항생제 없는 배지에서 안정적으로 Bcl-2 단백질을 과발현하였으며, 무혈청 부유배양에서 세포예정사를 억제하는 특성을 나타내었다. 이러한 CHO dhfr(-) Bcl2 숙주 세포주를 이용하여 인간화 항체를 생산 하는 재조합 CHO 세포주, CHO Bcl2-19-008과 CHO Bcl2-24-008을 확립하였다. CHO Bcl2-19-008과 CHO Bcl2-24-008은 대조군 세포주보다 세포예정사 억제를 통해 배양기간이 증가하였다. 또한 5 mM NaBu를 무혈청 부유배양 3일째에 첨가할 경우, 세포예정사를 통하여 CHO Bcl2-19-008은 무혈청 부유배양시보다 5배 증가된 $50㎍/mL^{-1}$의 최종항체농도를 나타내었으며, CHO Bcl2-24-008은 3배 증가된 $11㎍/mL^{-1}$의 최종항체농도를 나타내었다. 이에 비하여 대조군 세포주는 5 mM NaBu 첨가시에 급격한 세포예정사로 인하여 최종항체농도에 변화가 없었다.
