Mouse GABA A receptor beta 3 subunit gene (Gabrb3) is located at the imprinted region on chromosome 7. To detect a possible biased parental expression from Gabrb3 gene, a dimorphic PstI restriction enzyme site was used for restriction fragment length polymorphism (RFLP) analysis. RFLP analysis of PCR-amplified Gabrb3 cDNA from brain tissue of hybrid mice proved that Gabrb3 gene is not imprinted. Quantitative analysis of allelic expression of Gabrb3 showed that DBA/2 allele was more expressed than C57BL/6 allele in (C57BL/6 × DBA/2)F1 and (DBA/2 × C57BL/6)F1 hybrid mice indicating that Gabrb3 gene expression is influenced by strain-of-origin rather than by parent-of-origin For discrimination and quantitation of transcripts from homologous alleles without RFLP, allele specific termination (AST) analysis was developed. Control experiments with GABA A receptor gamma 2 subunit gene (Gabrg2) proved that AST analysis is highly sensitive for the minor allele transcript representing over 10% of total transcripts of a gene. Application of AST analysis revealed that Fas gene is equally expressed from both parental alleles in (C57BL/6 × BALB/C)F1 hybrid mouse.
생쥐의 염색체 7 번 중 각인된 부위로 알려진 근처에 위치하고 있다는 GABA A receptor beta 3 subunit (Gabrb3) 유전자의 제한 효소의 길이 다형성 분석을 통하여 Gabrb3 유전자가 C57BL/6 와 DBA/2 strain의 교배종 1 세대 생쥐의 뇌에서는 각인되어있지 않음을 밝혔다. Gabrb3 유전자 발현의 정량 분석을 통하여 C57BL/6 와 DBA/2 strain의 교배종 1 세대에서 DBA/2로부터 물려받은 형질이 보다 많이 발현되는 것을 밝혔다. Gabrb3 유전자의 발현은 부모의 형질 각인에 의한 영향이 아니라 strain의 유전적 배경에 의해 영향을 받음을 밝혔다. 형질 발현의 양적 차이를 분석하기 위한 방법으로 Allele Specific Termination (AST) 분석법을 개발하여 GABA A receptor gamma 2 subunit (Gabrg2) 유전자의 분석 조건 실험을 수행하였다. Gabrg2 유전자의 분석 조건 실험에서 미세한 형질 발현의 차이를 AST 방법으로 구별 할 수 있음을 보여주었다. AST 분석을 생쥐의 Fas 유전자의 발현에 적용하여 실험을 수행한 결과 Fas 유전자는 C57BL/6 과 DBA/2의 교배종 1세대에서 부모의 형질 각인 모습이나 strain의 유전적 배경에 의해 영향을 받는 형질 발현의 차이가 없음을 밝혔다.
