For the production of xylooligosaccharides, a Bacillus sp. with an endoxylanase activity was isolated from compost. The xylanase production reached upto 5 U/ml after 22 hours of incubation in LB medium at 30℃. The xylanase was purified by ammonium sulfate precipitation and gel filtration chromatography, The molecular weight of the xylanase was estimated to be 20,400 by SDS-PAGE and the isoelectric point was 10.6. Optimal temperature and pH of the xylanase was 60℃ and 6.5 respectively. The enzyme was stable at temperatures upto 40℃ and pH valuse from 4 to 10. The xylanase was completely inhibited by the addition of mercury ion and N-bromosuccinimide indicating possible involvement of tryptophan residue in the active site of the enzyme. Apparent $K_m$ and $V_{max}$ values for oat spelts xylan was 9.2mg/ml and 1954U/mg protein respectively. For birchwood xylan, the values were 6.3mg/ml and 1009U/mg protein. The predominant products of xylan hydrolysate were xylobiose, xylotriose and xylotetraose, indicating that the enzyme was an endoxylanase. The enzyme was highly specific to xylans as substrate with little activity toward lichenan. No activity was detected on CMC and cellulose. The xylanase hydrolysed upto 32% of reducing sugars from oat spelts xylan and 27% from birchwood xylan. Upto 85% of the enzyme was bound to 50mg/ml of insoluble fraction of oat spelts xylan after incubation at 30℃ for 30 minutes.
Xylo-올리고당의 생산을 위해 Xylan 분해 효소를 세포 밖으로 분비하는 Bacillus속 세균을 퇴비로부터 분리하였다. 분리된 세균은 30℃에서 22시간 동안 LB 배지에서 배양시켰을 때 약 5U/ml의 xylan 분해 효소를 배지 속으로 방출하였다. 이 효소는 ammonium sulfate에 의한 침전 방법과 gel filtration chromatography에 의해 정제되었다. 이 효소의 분자량은 SDS-PAGE에 의해 20,400으로 확인되었고 등전점은 isoelectric focusing에 의해 10.6으로 결정되었다. 이 효소의 최대 활성 온도와 최대 활성 pH는 각각 60℃와 6.5였으며 이 효소는 40℃ 까지의 열과 4에서 10까지의 pH에서 비교적 안정하였다. 이 효소는 수은 이온과 N-bromosuccinimide의 첨가에 의해 완전히 저해되었으며 이는 이 효소의 활성부위에 tryptophan이 존재함을 시사한다. 이 효소의 oat spelts xylan에 대한 Km과 Vmax는 각각 9.2mg/ml과 1954U/mg protein이었으며 birchwood xylan에 대해서는 각각 6.3mg/ml과 1009U/mg protein이었다. 이 효소에 의한 oat spelts xylan의 주요 가수분해 산물은 xylobiose, xylotriose 그리고 xylotetraose로 HPLC에 의해 확인되었으며 이로서 이 효소가 endoxylanase임을 알 수 있었다. 정제된 효소는 xylan에 대해 강한 기질 특이성을 보였고 lichenan에도 미량의 활성을 나타내었으나 CMC와 Cellulose에 대해서는 분해 활성을 보이지 않았다. 이 효소는 oat spelts xylan으로 부터 전체 환원당의 약 32%를 가수분해할 수 있었으며 birchwood xylan의 경우 약 27%를 가수분해하였다. 50mg/ml 불용성 xylan용액 상에서 30℃에서 30분간 처리한 결과 약 85% 정도의 효소가 불용성 xylan에 결합되는 것을 알 수 있었다.
