With the advances in microscopy, studies on correlative imaging methods, such as correlative light and electron microscopy (CLEM), have been studied. However, CLEM techniques are limited when using specific microscopes, or due to problem in sample preparation or probes itself. Herein, we propose a new CLEM technique based on gold-silver immunostaining, Dehydration-correlative microscopy (DeCom). Dehydration under ambient conditions allows simple and quick correlative imaging. Various analyses, including STORM, revealed that correlative imaging is possible despite sample dehydration under ambient conditions, and the change of the sample according to the growth of silver was confirmed. Additionally, multicolor imaging of cytoskeletal proteins, and microtubule severing protein with tubulin showed the possibility that DeCom can be used in several studies. As a result, DeCom has fewer instrumental requirements than SIM, super-resolution optical techniques, or other CLEM techniques, and will be particularly useful as a technique that provide high resolution images in a short time using SEM in the studies of cytoskeleton and cytoskeleton-related proteins.
현미경 기술이 발전하면서, 상관 광전자 현미경 기술(CLEM)과 같은 상관 이미징 방법들에 대한 연구들도 많이 연구되고 있다. 하지만, 범용적이지 않은 현미경을 사용하거나, 프로브나 시료 준비의 문제로 인해서 제한적으로 사용되고 있다. 여기서, 우리는 금-은 면역염색법에 기반한 새로운 CLEM 기술인 건조-상관 현미경 관찰법 (DeCom)을 제시한다. 주변 조건 건조는 간단하고 빠르게 상관 이미징이 가능하게 만들었다. STORM 이미징을 포함하여, 시료가 주변 조건에서 건조가 되더라도 상관 이미징이 가능함을 보였고, 은 입장 성장에 따른 시료의 변화에 대해서 확인하였다. 더불어, 세포 골격 단백질들의 다색 이미징과 미세소관 절단 단백질과 튜불린 단백질의 다색 이미징을 보여 DeCom이 여러 연구에서 사용될 수 있는 가능성을 선보였다. 따라서, DeCom은 SIM, 초고해상도 광학 현미경 기술들, 혹은 다른 CLEM 기술들보다 장비 요구조건이 적으며, 그리고 특히 세포 골격 및 세포 골격과 관련된 단백질 연구에서 주사전자현미경을 이용하여 단시간에 고해상도 이미지를 제공하는 기술로 유용할 것이다.