The human gene encoding the transcription elongation factor SII (TFIIS) was isolated and characterized. The comparison of sequence between TFIIS gene and cDNA showed that TFIIS gene doesn't carry any intron sequence. Based on Southern blot analysis and independent screening with 2 different genomic libraries, the gene appears to exist as a single copy in the haploid genome. Also, TFIIS protein expressed in E. coli from the cloned TFIIS gene stimulates RNA polymerase II transcription by 4-fold. The transcription initiation site was determined by S1 nuclease mapping. TFIIS promoter carries typical CCAAT box at-59 position existing in opposite orientation, and initiator sequence around the transcription initiation site. However, obvious TATA box couldn't be found and potential Spl recognition sequences was found at 189 and 381 nucleotides upstream from the transcription initiation site. These structural features are similar to the promoters of many housekeeping genes, whose activity is required in all cells and is not subject to environmental control.
사람의 genomic library로부터 전사연장인자로 알려진 TFIIS 유전자를 분리하여 그 특성을 규명하였다. TFIIS 유전자와 cDNA의 염기 서열을 비교해본 결과 TFIIS 유전자는 어떠한 intron 구조도 가지고 있지 않음을 보였다. Southern blot analysis와 두가지의 서로 다른 genomic library를 screening한 결과에 기초해 볼 때 TFIIS는 하나의 유전자로부터 발현됨을 알 수 있었다. 또한 TFIIS 유전자를 E. coli 에서 발현시켜 순수 분리한 TFIIS 단백질은 RNA polymerase II에 작용하여 전사를 4 배까지 촉진시켰다. TFIIS 유전자의 mRNA가 전사되기 시작하는 위치는 SI nuclease mapping으로 찾아 내었다. TFIIS 유전자의 promoter는 전사 개시 위치로부터 5' 방향으로 59 nucleotides 떨어진 부위에 역방향으로 존재하는 전형적인 CCAAT box와 전사 개시 부위의 initiator 염기배열을 가지고 있다. 그러나 명확한 TATA box는 찾을 수 없었고 그 5'방향으로 Spl이 작용할 수 있는 2개의 인식 부위(-189 와 -381 부위)가 발견되었다. 이러한 구조적 특성들은 주변 환경에 영향 받지 않고 모든 세포에서 그 기능이 요구되는 유전자들의 promoter 구조와 비슷하였다.
