By using indirect enzyme-linked immunosorbent assay and dot iommunobinding assay, two monoclonal antibodies were selected after fusion of mouse Sp2/0-Ag14 myeloma cells with spleen cells isolated from Balb/c mice that had been immunized with Trg protein preparated by SDS-PAGE and subsequent elution. Both antibodies were identified as Ig M.
Trg 단백질은 대장균에 있는 감각수용체의 일종으로써, 양성 주화성물질인 리보오스와 갈락토스의 농도 변화에 대한 신호전달에서 중심역할을 하는 것으로 밝혀졌다. Trg단백질의 구조와 기능적 연구를 위한 도구로써, Trg에 대한 단세포군 항체를 만들었다. 이들 단세포군은, SDS-PAGE와 단순 확산 방법에 의하여 분리한 Trg 단백질을 Balb/c 생쥐계에 주사한 후 얻은 비장 세포와 myeloma 사이의 세포 융합 방법을 통하여 만들었으며, 이들 중 두개의 단세포군이 Ig M을 분비한다는 것이 밝혀졌다. 또한 이들 두종류의 항체들은 단순 확산 방법으로 분리한 Trg단백질과 ELISA와 dot immunobinding assay에서 양성 반응을 나타내었다. 또한, 이 실험에서 수행한 dot immunobinding assay는 분석하고자 하는 항원의 양이 적은 경우에도 항원-항체 반응을 검출할 수 있는 좋은 방법으로 생각된다.