The immunosuppressive effect of 2-acetylamino fluorene and cyclophosphamide(CP) were investigated using the antibody forming cell assay and ELISA. In this study, antibody forming cell assay and measurement of secreted IgM level were simultaneously done in order to elucidate the correlation between two assay. Direct addition of AAF to the culture medium resulted in the suppression of polyclonal antibody response to LPS in a dose-related fashion. The secreted antibody level induced by LPS was also reduced in a similar profile. Time course studies demonstrated that antibody forming cell and secreted IgM reached maximum at day 2 and then decreased up to day 4. Treatment of AAF also showed similar pattern but suppessed antibody forming cell and IgM throughout culture periods, when compared to naive control. In order to study effects of CP, a co-culture system of rat hepatocytes and mouse splenocytes were used. CP also showed a dose-related suppression of antibody response to LPS when it was metabolized by rat hepatocytes. CP in itself did not produce suppression of antibody response even at highest dose, 1 mM. The secreted antibody level induced by LPS was also reduced in a similar profile. These results demonstrated that there was a good correlation between AFC assay and ELISA, and suggested that ELISA is a good assay system to screen for immunotoxic chemicals with similar sensitivity of AFC assay.
본 논문에서는 2-Acetylaminofluorene 과 Cyclophosphamide(CP) 의 액소성 면역 억제 작용에 관하여 연구하였다. 액소성 면역 억제작용의 검정 방법으로는 기존의 Jerne 과 Nordine 의 plaque 형성세포 검정 방법이 널리 이용되어 왔으나 본 연구에서는 면역학적 효소 방법중의 하나인 ELISA 를 면역 독성 검정 방법의 하나로서 도입하고자 시도하였으며 화학 물질에 의해 유도되는 액소성 면역억제 기작중에 plaque 형성세포 생성에 대한 억제 작용과 IgM 분비억제 작용과의 연관성을 조사해 보기위해 plaque 형성세포 검정과 ELISA 를 동시에 수행하였다.
AAF 는 대사체가 아닌 그 자체로서 면역 억제 작용을 나타내었고 CP 는 백쥐 간세포와 생쥐 비장 세포와의 공동 배양을 통해 CP가 대사 되었을 때에만 면역 억제 작용을 나타내었다. 위의 두 화학 물질은 항체 형성 세포 생성과 IgM 분비를 모두 억제하였으며 두 억제 기작간의 상호 연관성이 있는 것으로 나타났다. 또한 ELISA 는 기존의 plaque 형성 세포 검정 방법과 유사한 민감도를 가지는 좋은 면역 독성 검정 방법으로 확인되었다.
