For the effective enzymatic hydrolysis of olive oil, the potential of reverse-phase as a new reaction system was tried. Lipase was immobilized by adsorption in macroporous, organic synthetic resin, Amberlite XAD-7, and the catalytic reaction of immobilized lipase is performed on reverse-phase system which is composed of water-insoluble substrates and immobilized enzyme dispersed in nonpolar solvents. The optimum conditions for lipase immobilization, such as immobilization times, and amount of enzyme to be attached to the resin were investigated.
Isooctane was found to be the most effective organic solvent of the nine types of organic solvents tested for the hydrolysis of olive oil. The immobilized enzyme did not obey Michaelis-Menten kinetics and optimal conditions of reaction were 35℃ and pH 6.0. The enzyme activity was affected by stirring rates. Batch hydrolysis of olive oil by lipase in reverse-phase has been also carried out. Olive oil (10%, v/v) can be completely hydrolyzed within 5 hr.
물에 불용성인 지질을 효소로 사용하여 가수분해 하기 위해 새로운 효율적인 반응계로써 역상계를 시도했다. Lipase 는 다공성 이면서 큰 표면적을 갖는 유기 합성 수지인 Amberlite XAD-7 에 고정화 되었다. Lipase 고정화를 위한 조건으로는 온도 4℃, pH 6.0, 고정화 시간 2 시간 이었고, 흡착된 효소 양은 1 g 수지당 2.5 mg 이었다.
고정화 효소의 역상계 에서의 최적 반응 조건은 온도 35℃, pH 6.0 이었고 활성화 에너지는 11.80 Kcal/mol 이었다. 반응을 위한 가장 효율적인 유기 용매는 isooctane 이었으며 유기 용매가 전혀 없는 100% 올리브유 에서도 지방의 분해가 일어났다. 또한 반응 형태는 Michaelis-Menten 식을 따르지 않았다.
기질의 초기 가수분해 속도는 올리브유의 농도가 증가함에 따라 증가했다. 10% 올리브유의 경우 3 g고정화 효소 사용시 5시간 내에 100%가 지방산으로 전환되었고, 60%의 경우 15시간 경과후 70% 가 전환되었다.
