본 연구는 유산간균 및 유산구균으로 부터 plasmid DNA를 신속하고 간편하게 분리하기 위한 방법에 관한 것이다.
Glycine 을 TCM 배지에 0.5% 첨가했을 때, 그 배지에서 자란 유산균은 세포벽 형성이 상당히 억제되는 것으로 나타났다. 그 결과 mutanolysin 을 처리했을 때 용균효율이 glycine 을 첨가 않고 자란 정상균주 보다 5배나 증가 하였다.
Plasmid DNA 분리과정에서, plasmid DNA 분리효율은 mutanolysin 처리 조건에 따라 민감하게 변화되었다. 또한 실험균주에 따라 plasmid DNA 의 효율적인 분리를 위한 그 최적 조건이 조금씩 다르게 나타났다. 즉, 유산간균에서는 mutanolysin을 30 ug/ml에서, 37℃, 5-10 분간이였고, 유산구균의 경우는 일반적으로 동일농도에서, 37℃, 5분 이하였다.
본 방법을 이용하여, L. casei, L. acidophilus, L. helveticus, S. lactis, S. faecalis, S. faecium 과 S. cremoris 균주로 부터 plasmid DNA 를 신속하고 간편하게 분리할 수 있음이 확인 되었다. 뿐만 아니라, 배양액 (6Ⅹ$10^8$/ml) 1.5 ml 로 부터 분리된 plasmid DNA로 agarose gel 에서 분명하게 확인이 가능하였다.
