Gastric cancer also known as stomach cancer is the second and fourth most common cause of can-cer death in males and females respectively throughout the world. Especially, mechanism underlying diffuse type gastric cancer (DGC) formation is not fully understood. Therefore, understanding behavior of the for-mation of cluster as aggregation of HS746T, one of DGC cell line in vitro could contribute to develop therapeu-tic strategies of DGC.
In this study, we tried to identify the spatial distribution in terms of cluster, which implies cell-cell sig-naling. Cell signaling can be classified by the distance between cells such as autocrine signals themselves, jux-tacrine signals between adjacent or touching cells through gap junctions and paracrine signals in the vicinity.
In order to figure out cluster to understand visualized cell signaling, we analyzed images using mean-shift clustering method at ‘Fiji’ software. We standardized the methods to analyze nuclei clustering pattern by increasing seeding density and stiffness, which can presume the progress of tumor cell growth.
We confirmed the cluster area at high cell confluency was relatively bigger than low cell confluency image. Interestingly, even low cell confluency had relatively high cluster area because biased and compact cell distribution enables to diffuse signaling molecules effectively.
In conclusion, cluster analysis just by the images is expected to substitute the additional proliferation assay to understand interactions between cell network. Thus, quantified cluster area and number caused by cell signaling may assist future studies to presume and identify tumor aggregation or metastasis.
위암에 의한 사망률은 높다. 전세계적으로 암에 의한 사망률은 폐암에 이어 2위를 차지한다. 위벽으로 침투해서 자라는 미만성 위암 (diffuse type gastric cancer)의 경우 발병과 진행에 관한 메커니즘이 아직 불분명하다. 미만성 위암 세포주가 군집을 이루는 현상을 이해한다면 치료에 기여할 수 있다.
본 연구는 세포 파종 밀도를 통한 화학적 상호작용과 콜라겐 밀도를 이용한 물리적 상호작용에 따른 세포 군집 양상을 밝히고자 했다. 세포 군집 양상은 세포 내의 신호, 붙어있거나 거리가 떨어진 세포간의 물질 확산성을 내포한다.
세포 군집은 분석은 ‘Fiji’라는 소프트웨어에서 평균 변화 군집화 (mean shift clustering)방법으로 했다. 군집 면적은 파종 밀도가 작을 때보다 클 때 더 크게 나타났다. 세포 수가 적어도 한 쪽에 치우쳐 분포할 경우에도 군집 면적은 컸다. 이로써 군집은 세포 전체 면적율 (confluency)에 관계 없이 세포끼리 무리를 이루었는지를 알려주는 지표임을 확인하였다.
이러한 결과로부터 군집 분석은 증식할 수 있는 환경을 내포함으로써 별도의 증식 검사를 대체할 수 있을 것으로 기대한다. 군집 면적과 개수 분석 방법은 암세포가 응집하여 전이할 가능성을 가시화 및 정량화 하는 모델로 사용 가능할 것으로 기대된다.
