A $\mbox{\underline{Penicillium}}$ species producing high activity of glucose oxidase was obtained. The microorganism produced 1.08-1.52 U of glucose oxidase per ml of medium. Using the ammonium sulfate fractionation, followed by the combination of gluconyl- ω- aminohexyl Sepharose affinity chromatography and Sepharose 6B gel filtration techniques, the enzyme was purified from broth with 27.2 folds of purification and the final preparation showed 90.8 U of glucose oxidase per mg of protein and a single band by 7% polyacrylamide gel electrophoresis. Absorption spectrum and substrate specificity of the enzyme were studied and the final preparation of the enzyme showed the optimal pH at 6.0, the optimal temperature at 40 ℃, $0.85 ×10^{-2}$ M of Km for D-glucose, and 3.43 Kcal per g-mole of the activation energy.
A preliminary experiment was carried out on peroxidase of Korean radish.
Glucose oxidase의 생산과 정제에 관한 연구가 시도되었다. 여러개의 곰팡이로 부터 glucose oxidase 생산에 관해 실험한 결과, Penicillium sp.가 가장 많은 glucose oxidase를 배양액 중에 배출해 내었다. 이 미생물은 아직 동정되지 않았다.
Glucose oxidase 역가를 보이는 PS-8균주 배양액을 ammonium sulfate로 60%-90% 포화시킨 획분을 D-gluconyl-w-diamino hexyl-Sepharose 6B gel filtration에 의해 순수분리하였다. 이 효소 제품은 7% polyacrylamide전기영동적으로 단열 대로 나타났음을 보여준다.
이렇게 정제한 효소를 사용하여, 기질의 특이성과 흡광곡선을 조사하였다. 이 효소는 포도당에 대해 높은 특이적 반응을 보였다. 정제효소를 사용하여 조사한 결과, 최적 pH는 6.0, 최적온도는 40 ℃, Km값은 $8.5 × 10^{-3}M$, 활성화에너지는 3.43Kcal/g.mole 임을 알았다.
