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Gluconobacter melanogenus의 nicotinamide nucleotide independent polyol dehydrogenase 에 관한 연구 = Studies on the nicotinamide nucleotide independent polyol dehydrogenase from gluconobacter melanogenus
서명 / 저자 Gluconobacter melanogenus의 nicotinamide nucleotide independent polyol dehydrogenase 에 관한 연구 = Studies on the nicotinamide nucleotide independent polyol dehydrogenase from gluconobacter melanogenus / 김강화.
발행사항 [서울 : 한국과학기술원, 1977].
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A polyol dehydrogenase responsible for the conversion of acyclic polyol to the corresponding ketoses was isolated and partially purified from cell free extracts of acetic acid bacteria, $\mbox{\underline{Gluconobatacter}}$ $\mbox{\underline{melanogenus}}$, and its general properties were characterized. The enzyme was found to be aerobic in nature and to utilized 2.6-dichlorophenolindophenol as an external electron acceptor for the specific oxido-reduction reaction. No requirement of pyridine nucleotide coenzyme was found for the conversion of D-sorbitol to L-Sorbose. The enzyme was found to be different from the other polyo1 dehydrogenase requiring $NAD^+$ as a cofactor for the enzyme activities. The enzyme showed a broad substrate specificity, but seems to be very specific towards acyclic polyols having the L-erythro configulation. The Km values for D-sorbitol and D-mannitol were obtained as $3.8 ×10^{-1}$M and $4.0 ×10^{-2}$M, respecively. The maximum activity of the enzyme was obtained at $p^H$ 5.4 and 30C. The enzyme was inhibited by iodoac etamide and heavy metal ions ($Ag^+$ and $Hg^{++}$ ions) remarkably. The results from inhibition study with substrate analogous and other inhibitors for biological oxidative reaction suggest that the enzyme may possibly be linked to cytochrom a and b in a membrane bound respiratory chain.

Gluconobacter melanogenus 를 D-sorbitol 를 탄소원으로 한 배지에서 배양한 균체를 초음파 처리하여 얻은 추출액을 $(NH_4)_2 SO_4$ 침전에 의하여 분획할때 0-40% 침전 중에서 nicotinamide nucleotide independent polyol dehydrogenase 활성을 발견하였다. 이 효소의 반응 생성물을 paper chromatography 방법과 cysteine-Sulfuric acid 방법에 의해서 확인한 결과 D-sorbitol 과 D-mannitol 은 각각 L-sorbose 와 D-fructose 로 산화되었다. 이 효소는 인공전자 수용체인 2.6 Dichlorophenol 과 ferricyanide 를 환원시켰는데 그중에서 2.6 Dichlorophenol indophenol 의 환원을 이용하여 효소 활성도 측정을 할수 있었다. 이러한 효소활성도 측정방법에 의해서 측정한 결과 최적 pH 는 5.4 였으며 D-Sorbitol에 대한 Km 은 $3.8 × 10^{-2}M$ 이었다. D-sorbitol, D-mannitol 과 아울러 i-erythritol, D-arabitol, D-adonitol에도 작용하는 L-erythro configulation 기질특이성을 갖고 있었다. D-sorbitol의 산화가 일어날때 산소를 필요로 했으며 이때 흡수된 산소 1 mole 에 대해 L-sorbose가 2 mole 생성되었다. 효소반응에 있어서 산소로의 전자전달은 Cyt a와 Cyt b 를 포함하는 것으로 예상되는 호흡연쇄계를 통하여 일어나는 것으로 나타났다.

서지기타정보

서지기타정보
청구기호 {MBE 7702
형태사항 [iii], 60 p. : 삽화 ; 26 cm
언어 한국어
일반주기 저자명의 영문표기 : Kang-Hwa Kim
지도교수의 한글표기 : 이현재
지도교수의 영문표기 : Hyun-Jae Lee
학위논문 학위논문(석사) - 한국과학기술원 : 생물공학과,
서지주기 참고문헌 : p. 56-60
주제 Enzymes.
Proteins --Seperation.
Aldose reductase.
Gluconobacter속. --과학기술용어시소러스
기질 특이성. --과학기술용어시소러스
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