Heat shock protein 70 (hsp70), is the major protein expressed when cells are heat-shocked. We tried to isolate hsp70 cDNA from mouse fibroblast ID13. ID13 cDNA library was screened with human hsp70 gene as a probe, and a positive clone was obtained. The positive clone was subcloned into pUC19 and the precise restriction map was obtained. The cDNA gene was sequenced by Sanger dideoxy termination method. A single long open reading frame that could code for a protein of 643 amino acids was found. The sequence of cloned mouse hsp70 shows great homology (60-97%) with other mouse hsp 70 genes and somewhat less homology (50%) with E. coli hsp 70 gene (dnaK). The great homology (97%) with already cloned mouse heat shock cognate 70 kDa protein (hsc70) make us to think that the cloned gene is constitutively expressed at normal temperature.
고온 충격 단백질 70 (hsp70)은 분자량이 70 kDa 으로 세포를 42℃에서 배양하였을 때 생성되는 단백질중 대표적인 것이다. 우리는 생쥐 섬유아세포인 ID13에서 hsp70 유전자를 분리하기 위해서, 사람의 hsp70 유전자를 탐침으로 사용하여 ID13 세포의 cDNA library를 스크리닝하여 양성 클론을 찾아냈다. 얻은 cDNA 유전자를 pUC18, 19 또는 M13mp18, 19 에 옮겨 DNA 염기서열을 분석하였다. 얻은 cDNA는 643개 아미노산으로 이루어진 단백질 의 정보를 담을 수 있는 것이었다. 이 생쥐 섬유아세포의 hsp70 유전자의 염기서열은 이미 발표된 생쥐의 hsp70 과 큰 유사도 (60-97%) 를 보였고, 대장균의 hsp70 (dnaK) 과는 50% 정도의 유사도를 보였다. 또한 고온 충격을 주지 않아도 정상 상태에서 발현되는 heat shock cognate protein (hsc70)과 커다란 유사도 (97%)를 보이는 것을 볼때 우리가 클로닝한 유전자는 정상 온도에서도 발현되는 hsc70의 일종으로 추정된다.
