Kaposi’s sarcoma-associated herpesvirus (KSHV) belongs to a human gammaherpesvirus that has a latent phase in host cells. ORF50 protein is the most important protein in reactivation to lytic phase and it is known as a strong transcriptional activator. Transactivation of promoters by ORF50 is done via response elements, so we tried to find ORF50 response elements in ORF50, K8, and ORF57 promoters with transient transfection assays of deletion mutants. We found smaller regions for activation by ORF50 in three promoters. The patterns of each response element are quite different and there is no conservative sequence, so ORF50 protein response elements are heterogeneous. AP-1 protein is participated in ORF57 promoter activation by ORF50, this result can be acquired by competitive electrophoretic mobility shift assay. ORF57 protein is a homolog of ICP27, a pleiotropic protein. We supposed that CBP is mediated because of the fact that ORF57 repress CREB mediated transcriptional pathway and p53 mediated transcriptional activation, in virto binding assay showed direct binding of CBP2 fragment (C/H3 domain) and C-terminus of ORF57. We can conclude ORF57 protein has strong repressor activity and CBP is related to this ORF57 activity
카포시 육종 허피스 바이러스는 숙주세포에서 잠복기를 거치는 특징이 있는 사람에 감염하는 gammaherpes 바이러스에 속한다. ORF50 단백질은 lytic 상태로 전환하는 데 가장 중요한 단백질이며 강력한 전사활성인자로 알려져 있다. 프로모터의 활성은 반응요소를 통해 이루어지므로 우리는 ORF50, ORFK8, 그리고ORF57의 프로모터에 존재하는 ORF50의 반응요소를 deletion mutants를 통한 실험으로 찾았다. ORF50 단백질은 하나 또는 두개의 반응요소를 통해 세 개의 프로모터를 활성 시킨다. 이들 반응요소 각각은 다른 경향을 보이고, 보존되는 염기서열이 없었으므로 ORF 50 단백질의 반응요소는 정형화된 형태를 보이지 않음을 알 수 있다. 그리고 AP-1 단백질이 ORF57의 활성에 관련된다는 결과를eletrophoretic mobility shoft assay를 통해 얻었다. ORF57 단백질은 다양한 기능이 알려진 ICP27 단백질과 상동하다. 우리는 ORF57이 CREB이 관련된 전사조절 pathway와 p53이 관련된 전사조절활성을 모두 강하게 억제시키며 in vitro에서 CBP와 ORF57이 붙는다는 사실을 통해 CBP가 매개된다고 예상했다. 우리는 ORF57 단백질에 강한 억제능력이 있음을, 그리고 이러한 ORF57 단백질의 능력에 CBP가 관련되어 있음을 유추할 수 있었다.
