To investigate the protein profile of apple(Malus domestica cv. Fuji) fruit and isolate apple fruit-specific proteins, total proteins of apple leaf and fruit of the breaker stage were compared by SDS-PAGE(Sodium dodacyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis) Four major protein spots were found to be expressed in a fruit-specific manner and two of them, protein A and C, 60kDa and 31kDa respectively, were purified and their N-terminal sequences determined. Protein C was identified as the same protein with a 31 kDa major allergen/disease resistance protein homolog. It also had homology with variety of thaumatin-like proteins, a group of pathogenesis-related proteins from various plant species. The existence of thaumatin-like proteins in many other ripening fruits was reported, suggesting that this group of proteins play a role in fruit ripening, not only the defence role to pathogen infections. The partial peptide sequence of protein A, the most abandunt protein from ripening apple fruit had no homology with known protein. A DNA probe was synthesized by PCR for the cloning of the gene encoding protein A.
사과 과일이 익을 때 생기는 분자 생물학적 현상을 규명하기 위해, 사과 과육과 잎 조직에서 각각 전체 단백질을 뽑아 SDS-PAGE와 two dimensional gel electrophoresis로 비교하였다. 4가지 단백질이 과육에서 특이적으로 발현하였으며, 그 중에서도 많은 양으로 발현하는, 분자량이 60kDa, 31kDa인 단백질 A(60kDa)와 단백질 C(31kDa)를 ion exchange column chromatography와 gel permeation chromatography를 거쳐 순수 분리하고 그 N-말단 아미노산 서열을 분석하였다.
단백질 C는 사과의 31 kDa major allergen/disease resistance protein homolog와 같은 단백질임이 밝혀졌다. 또한 이 단백질은 식물 면역 단백질의 한 종류인 Thaumatin-like(TL) 단백질들과 서열이 유사하였다. 포도와 Cherry 등 다른 여러 과일에서도, 과일이 익으면서 TL 단백질들이 다량으로 축적되는 현상이 최근 보고되고 있다. 단백질 A의 부분 아미노산 서열은, 지금까지 알려진 단백질들과는 유사성이 없었으며, 이 단백질의 유전자를 찾기 위해 RT-PCR에 의해 DNA probe를 만들었다.
